A. 核酸檢測流程
核酸檢測常規的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌版洗液等,權過程如下:
獲得患者樣本後,需盡快進行檢測,如無法立即檢測需要轉運的樣本,應按照說明書的要求進行低溫封裝,並送到專門的檢測機構進行檢測。檢測機構收到樣本後,對樣本進行核酸提取,核酸提取試劑應使用批准產品說明書中指定的核酸提取試劑盒。
病毒RNA需要首先逆轉錄為cDNA,再進行擴增檢測。PCR擴增和檢測應使用批准產品說明書中指定的熒光定量PCR儀,通過熒光定量PCR所得到的樣本Ct值的大小,可以判斷患者樣本中是否含有新型冠狀病毒。
(1)新冠核酸檢測是怎麼測圖片擴展閱讀:
目前,臨床上核酸檢測主要是通過咽拭子檢測方法,流程是先囑被檢查者用淡鹽水漱口,可以將口腔中的雜菌清理掉,然後將標簽貼於標本容器上。
告知被檢查者取咽拭子培養的目的和方法,點燃酒精燈,囑咐被檢查者張口的,發啊的音,充分暴露咽喉部,用培養管內的消毒長棉簽以靈敏而輕柔的動作擦拭兩側齶弓和咽扁桃體上的分泌物,取樣完畢後,將試管口在酒精燈火焰上進行消毒,然後將棉簽插入試管,塞緊後及時送檢。
核酸檢測作為病原診斷的一個重要依據,是目前確診的最重要依據,比如對於目前新冠肺炎的檢測,病毒核酸檢測仍是確診的金標准。
B. 迄今為止,我國檢測新冠病毒有哪些方法
1、熒光PCR法。PCR法指的是聚合酶鏈式反應,能將微量的DNA大幅增加。熒光PCR檢測的原理為——隨著PCR的進行,反應產物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。最後通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
2、聯合探針錨定聚合測序法。這種檢測主要是用專門的儀器檢測測序載片上DNA納米球攜帶的基因序列。這種檢測的靈敏度高,不容易漏診,但結果也容易受多種因素的影響而不準。
3、恆溫擴增晶元法。檢測原理是基於核酸之間的互補結合特性開發的一種檢測方式,能夠用於定性或定量測量存在於生物體內的核酸。
4、病毒抗體檢測。抗體檢測試劑是檢測血清中由病毒進入人體後刺激人體產生的IgM或IgG抗體,IgM抗體出現較早,IgG抗體出現較晚。
5、膠體金法。膠體金法是用膠體金試紙進行檢測,也就是常說的快速檢測試紙。這種試紙經過特殊標記,上面有孔,用於滴入受檢者的血清樣本。
6、磁微粒化學發光法。化學發光法是一種高度敏感的免疫檢測,凡具有抗原性的物質都可以用這種方法測定。
C. 核酸檢測的原理是什麼
核酸檢測其實是檢測受測者體內是否有新冠病毒的核酸(RNA)。每種病毒的核酸內部都含有核糖核苷酸,不同的病毒所含的核糖核苷酸數量和排列順序不同,使得每種病毒都具有特異性。
新冠病毒的核酸也是獨特的,核酸檢測就是對新冠病毒的核酸進行特異性檢測。在進行核酸檢測之前,需要採集受測者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本,對這些樣本進行檢測,就可以發現受測者的呼吸道感染了什麼病菌。新冠病毒核酸檢測常用的是咽拭子樣本檢測,將樣本裂解提純,從中提取出可能存在的新冠病毒核酸,檢測的准備工作就做好了。
新冠病毒核酸檢測主要用熒光定量RT-PCR技術,這種技術是熒光定量PCR技術與RT-PCR技術的結合。在檢測過程中,先採用RT-PCR技術將新冠病毒的核酸(RNA)逆轉錄為對應的脫氧核糖核酸(DNA);再採用熒光定量PCR技術,將得到的DNA進行大量復制,同時,使用特異性探針對復製得到的DNA進行檢測,打上標記。
如果存在新冠病毒核酸,儀器就可以檢測到熒光信號,而且,隨著DNA的不斷復制,熒光信號不斷增強,這樣就間接檢測到了新冠病毒的存在。
核酸檢測為陽性不一定是確診
核酸檢測結果呈陽性,就可以確認受測者上呼吸道存在病毒核酸,但並不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測為陽性的情況下,還要綜合流行病學史對受測者進行進一步的診斷,如果受測者還有發熱、咽痛、咳嗽、乏力等症狀,以及與已確診的感染者有接觸史等,就可以診斷為確診病例。
如果受測者沒有任何相關症狀,一般診斷為無症狀感染者。無症狀感染者也有傳染性,而且一些無症狀感染者後來也開始出現症狀,變成了確診患者。
以上內容參考 瀟湘晨報—核酸檢測的原理到底是什麼?為什麼會出現假陰性?
D. 核酸檢測是怎樣檢測的
眾所周知,新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是一種烈性呼吸道傳染病,其病原體為新型冠狀病毒。若想證實已出現的感染症狀是由本病毒所引起,最准確的方法是從患者體內分離出活病毒,並進行病毒培養。
然而,此方法並不適合大面積應用,在此次疑似病例的確診工作中,也並不適用。這是因為病毒培養所需時間較長,需要的場所條件也很高(P3級實驗室),時效性遠遠跟不上臨床需要。
而核酸檢測作為病原學的檢測手段之一,效率很高,一般情況下幾個小時就可以知道結果。因此,在此次疫情中,臨床上取得病原學證據的主要方式並不是病毒培養,而是核酸檢測。
核酸是遺傳信息載體,是對DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的統稱。病毒則主要由遺傳物質和蛋白質組成。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒,其遺傳物質是單鏈RNA。核酸檢測的原理,正是檢測在被測者的咽拭子等樣本中,是否存在病毒的RNA。如果存在,說明被病毒感染。那麼,我們是否已經獲悉了病毒的RNA呢?
△RNA與DNA(圖片來源網路)
在武漢疫情初期,中國疾病預防控制中心應用宏基因組學技術,在短時間內完成該病毒的鑒定,並獲取了全基因組序列。在病毒全基因組序列公布後,實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)試劑被快速研發。
隨後,核酸檢測試劑盒被應用於臨床,並為確診新冠肺炎提供病原學證據。那麼,應用試劑盒進行核酸檢測,究竟是怎樣的一個過程呢?
首先,檢測人員需要在試劑的幫助下,將樣本中的核酸提取出來。再把已經分離出來的核酸加到核酸擴增試劑中,然後將其放到核酸擴增儀內,一般兩個小時內就會有結果。
事實上,在操作步驟中,擴增是很重要的一環。擴增的意義在於能讓微量的遺傳信息成指數增加。只要樣本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,從而更清晰地與病毒全基因組序列實現比對。
實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法已在臨床實驗室應用多年,檢測體系成熟,具有特異性強、靈敏度高、檢測周期短和可定量檢測的優點,而且還能對病毒感染程度和治療效果進行動態監測。
中日友好醫院呼吸與危重症醫學科主任醫師陳欣在記者采訪中介紹道:核酸檢測十分敏感,只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸,就可以通過RT-PCR擴增的方式,整合成序列。
"雖然不確定核酸是否來自於活病毒,但對於有呼吸道感染症狀的患者或疑似患者來說,如果其咽拭子有這種核酸,一般認為來源於活病毒的一部分,間接證實其體內存在著病毒的繁殖和感染。" 陳欣告訴記者。
核酸檢測容易出現"假陰性"
雖然核酸檢測有靈敏度高、檢測周期短等優點,但也存在著一定的弊端。不同於從人體內直接分離出活病毒的方式,核酸檢測採用的是一種間接的方式,有可能造成假陰性。
因為試劑盒存在最低檢測限的問題,所以只有當採到的樣本中,病毒的含量達到一定程度時才能檢測出來。少數情況下,可能康復者並未康復,但由於樣本中病毒載量低,故康復者核酸檢測的結果呈陰性,也就是我們常說的"假陰性"。
因此,在《新型冠狀病毒肺炎診療標准(試行第七版)》中,出院標准之一為連續兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性(釆樣時間至少間隔24小時)。
而之所以選取呼吸道標本進行核酸檢測,是因為新冠肺炎屬於呼吸道傳染病,故而優先考慮從呼吸道的分泌物中取得標本。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;後者主要包括氣管、主支氣管及肺內各級支氣管。
相應地,現在對疑似患者檢測病毒核酸,標本的採集一般有兩大類,上呼吸道標本和下呼吸道標本。
上呼吸道標本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子(NPS)、鼻咽吸取物(NPA);下呼吸道標本主要包括痰液、氣管吸取物、支氣管肺泡灌洗液(BALF)等。
E. 核酸檢測是怎樣檢測的新冠病毒核酸檢測的原理是什麼
除朊病毒外的所有生物都含有核酸,核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。新型冠狀病毒是一種只含有核糖核酸的病毒。在新冠病毒出現後,我國科學家在短時間內完成了對新冠病毒的全基因組序列的分析。在核酸檢測過程中,如果在患者樣本中發現新型冠狀病毒特殊的核酸序列,則說明該患者可能感染新型冠狀病毒。
樣本收集在臨床核酸檢測中,首先需要根據試劑盒的樣本要求進行樣本的收集。樣本類型主要包括咽拭子,鼻拭子,痰液,支氣管灌洗液,肺泡灌洗液等。考慮到利於操作等多種因素,核酸檢測樣本多為鼻拭子。鼻拭子和口咽拭子的提取方法如下:
用一根較長的棉簽插入鼻孔,通過鼻腔取鼻咽後部的分泌物;口咽拭子則是從口腔進入,擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物。
核酸檢測全程時間比較短,無創口,高效快速。檢測完就可以離開,回去等待結果就好。考慮到新型冠狀病毒 感染症狀的特殊性,有條件以及所處地區有要求的人要積極配合完成核酸檢測。
F. 核酸檢測怎麼做
核酸檢測需要去正規的醫院或者防疫中心進行檢測。
檢測步驟:
1、首先,核酸檢測盒子,也就是現在用於新冠狀病毒檢測的方式,這個盒子中主要檢測「法寶」採用咽拭子。用咽拭子擦拭咽後壁及雙側咽扁桃體處各5-10次,且不斷旋轉拭子。
2、醫務人員進行留樣,將拭子頭浸入細胞保存液中,折斷尾部後立即旋緊管蓋子。
3、保存,將樣本管放入密封袋中及時送檢,而送檢過程中需要嚴格的運輸環境,2-8攝氏度保存。
4、操作核酸提取(反應管理),將滅活病毒後的樣本進行核酸提取,用於後續檢測。
5、熒光PCR核酸檢測,也就是.上機器檢測,將提取物進行熒光PCR擴曾反應,需要70--80分鍾。
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1、新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。
2、通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。
3、感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。
G. 核酸檢測是什麼樣的流程新冠病毒是怎麼被查出來的
核酸檢測的流程非常簡單:1.採集人體分泌物,用棉簽在口腔底部摩擦留下細胞。2.醫務人員留樣,將棉簽保存好。3.樣本保存後,送進實驗室進行核酸提取。4.進行熒光PCR核酸檢測,將提取物進行熒光PCR擴增反應。5.獲得報告,如果檢測結果如果是陽性,則需要再進行復核檢測。
新冠病毒主要是通過對病毒的遺傳物質RNA進行檢測 ,用實時熒光RT-PCR檢測標記物,如果出現了熒光反應,這說明患者感染了新冠病毒。
H. 核酸檢測有哪幾樣檢測
核酸檢測採用咽拭子檢測,有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。
口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽塗擦,刷取咽喉部位上皮細胞的檢測。受檢測者只要放鬆心情,張口發出「啊——」的聲音就可以了,檢測過程並沒有創傷風險,是非常安全的檢測。
檢測時可能會有惡心、想要嘔吐的不適感覺,不過這些不適症狀通常只需要半分鍾到兩分鍾左右就可以完全緩解了。鼻咽拭子采樣是將一根細棉簽深入鼻孔,從下鼻道深入抵達鼻咽後壁,然後捻轉棉簽取樣。棉簽進入鼻腔的深度約為鼻尖到耳垂的距離。
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核酸檢測相關知識:
核酸檢測是檢測病毒的方法,它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測,可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染,以及推測是否具有傳染性。
季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份,從而判斷被檢測者是否屬於感染者。
新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了,只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分,可以盡早發現感染者,甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。
感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除,不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。